关于荧光定量PCR，小编查阅了很多资料，然而对着一叠厚厚的资料却打了隔。But，凭着对PCR的无(被)限(逼)热（无）爱（奈），小编依然没有放弃，终于，功夫不负有心人，在思过崖上找到了PCR的“独孤九剑秘籍”，学了一招半式。在此分享给小伙伴们，望他日行走江湖时可以底气十足。

首先，介绍几个PCR相关术语。

扩增引物：人工合成的寡核苷酸序列，其序列与带扩增的目标DNA序列中的一段相同，用于引导DNA体外扩增。

扩增模板：DNA体外扩增中所用的待扩增的靶标序列。

CT值：实时荧光PCR反应中每个反应管荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数。

荧光染料：可以和扩增产物结合而发出荧光的物质。

Taq酶：也叫DNA聚合酶，可以催化新DNA的合成。

溶解曲线：

使用染料法的时候，在PCR反应结束后，通过缓慢升温，并实时监测荧光值，所得到的曲线。用于分析PCR产物是否特异、PCR产物之间的碱基差异。

首先，具备相关的反应物是PCR反应的前提。

当反应启动之后，随着不同的温度及时间，反应步骤（过程）各有千秋。反应过程分为变性、退火和延伸三个阶段。

1.变性阶段是目标序列在解链。

2.退火阶段是引物（primers）和解开的DNA单链结合。

3.延伸阶段是在引物和聚合酶的引领下，反应利用体系的dNTPs合成新的DNA。

反应从变性到退火再到延伸称为一个循环，反应通常需要持续多个循环，产物产生的荧光才能被检测器检测，因此被检测到的阈值称之为CT值，最终得到的DNA数量原则上为2n次方。

据小编所知，在实际操作过程中，反应一般需要进行小时，也就是说，在短时间内，我们完全可以大量得到需要的目的DNA片段，然后用作下一步实验研究。荧光定量PCR目前已经广泛用于医疗。植物保护、动物检疫和食品安全等多个领域。这让小编体会到了科技的神奇，原来一个小小的反应管里隐藏这么多的信息。