近年来,分子遗传学诊断技术发展迅速,荧光定量PCR(QF-PCR)技术、荧光原位杂交(FISH)技术、多重连接探针扩增(MLPA)技术、实时荧光PCR技术、染色体微阵列分析(CMA)技术、产前液相芯片(BoBs)技术、无创性产前基因检测(NIPT)等已逐渐成熟,并开始向临床转化。分子遗传学诊断技术多以遗传物质DNA为检测对象,不需要进行细胞培养,为传统的细胞染色体核型分析技术提供了有效的补充。
QF-PCR技术在国外已有较广泛的应用,但目前尚未在国内产前诊断临床中普遍开展。为规范使用QF-PCR技术,由国家卫生和计划生育委员会召集、中国医学科学院北京协和医院产前诊断中心主办的"全国产前筛查与诊断技术管理规范编制研讨会"于2015年11月14日在成都召开,会议就QF-PCR等快速产前诊断技术的临床应用进展及其在国内应用中存在的具体问题进行了深入而广泛的探讨,并形成了QF-PCR技术在产前诊断中的应用专家共识。
QF-PCR技术在产前诊断中的规范化应用
1产前诊断技术资质:
QF-PCR技术临床检测项目应在有产前诊断资质的医疗机构中开展。项目申请的要求参照我国卫生行业标准《胎儿染色体异常与开放性神经管缺陷的产前筛查与诊断技术标准》(WS 322.2-2010)。申请QF-PCR技术检测的医师应是经过产前诊断专业培训的、有资质的医师。
2产前遗传咨询资质:
在进行产前QF-PCR检测前和检测后,必须对孕妇及家属进行相关的产前遗传咨询。根据2002年颁发的《产前诊断技术管理办法》的有关规定,从事产前诊断技术的卫生专业技术人员,必须经过系统的产前诊断技术专业培训,通过省级卫生行政部门的考核并获得从事产前诊断技术的"母婴保健技术考核合格证书"。
3签署知情同意书:
在进行产前QF-PCR技术检测之前,必须与孕妇有充分的知情谈话,需说明QF-PCR技术检测的内容、风险和技术局限性,并签署相关的知情同意书。
4标本采集:
参照卫生行业标准《胎儿染色体异常与开放性神经管缺陷的产前筛查与诊断技术标准》(WS 322.2-2010)进行标本采集。
5QF-PCR技术的实验室检测:
QF-PCR技术检测应在获得体外基因扩增检测资质的PCR实验室中进行。实验室应配备毛细管电泳仪、PCR扩增仪等相应的实验设备,并建有实验操作技术文件;实验室操作人员应经过体外基因扩增检验实验室技术的专业培训并获得许可资质;出具诊断报告的人员应是具备产前诊断资质的医师,并经过QF-PCR技术的相关培训。
6QF-PCR技术检测报告的应用:
出具QF-PCR技术检测报告时,应在报告中明确说明检测结果的提示意义与局限性。
QF-PCR技术虽然不能检测完整核型,但对21三体、18三体、13三体及性染色体的数目异常而言,是1项性价比较高的产前分子遗传学诊断技术,有良好的应用前景。在产前筛查蓬勃发展,而国内产前细胞染色体核型分析诊断资源不足的情况下,规范应用QF-PCR技术有助于缓解细胞染色体核型分析供不应求的矛盾,也有助于加强我国染色体异常出生缺陷二级预防的力量,完成常见染色体非整倍体异常的产前诊断,希望在降低严重缺陷儿出生率、提高出生人口素质等方面发挥出积极的社会意义和经济意义。